Transpolacental Passage of Insulin u kobiet w ciąży z cukrzycą insulinozależną – jej rola w makrosomii płodowej ad

Wszystkie kobiety otrzymywały leczenie IDDM zgodnie ze standardowym protokołem, którego szczegóły opisano gdzie indziej, w którym kontrolę glikemiczną uzyskano stosując schematy dawkowania krótko działającego i pośredniego działania insuliny. Czterdzieści pięć z 51 kobiet otrzymywało insulinę bydlęcą lub świńska przed i podczas ciąży, podczas gdy 6 kobiet uprzednio leczonych insuliną bydlęcą lub świńskiej otrzymywało insulinę ludzką począwszy od szóstego tygodnia ciąży. Celem kontroli glikemii był poziom glukozy we krwi na czczo mniejszy niż 5,5 mmol na litr i poziom glukozy we krwi poniżej 7,8 mmol na litr 90 minut po jedzeniu. Średnia (. SD) dzienna dawka insuliny podczas drugiego i trzeciego trymestru wynosiła odpowiednio 0,85 . 0,3 i 1,06 . 0,5 U na kilogram masy ciała. Wartości hemoglobiny glikozylowanej we krwi matki mierzono co miesiąc w celu oceny adekwatności kontroli glikemicznej8; średnia wartość w momencie porodu wynosiła 8,2 . 1,7% (zakres normalny, <8,5%). Badanie ultrasonograficzne wykonano podczas pierwszej wizyty i powtórzono w 20 tygodniu ciąży, aby zweryfikować ciążę. Wiek ciążowy został również potwierdzony kliniczną oceną noworodka. Jedno niemowlę dostarczono w wieku 32 tygodni, 22 niemowlęta w 34 do 37 tygodni i 28 w ponad 37 tygodniu ciąży; 80 procent zostało dostarczonych przez cesarskie cięcie. Próbki surowicy pępowinowej i płynu owodniowego przechowywano w temperaturze -70 ° C od momentu pobrania. Protokół badania został zatwierdzony przez instytucyjną komisję recenzyjną University of Cincinnati Medical Center, a każda kobieta wyraziła świadomą zgodę na badanie. Makrosomię zdefiniowano jako masę urodzeniową większą niż 2 SD powyżej średniej masy ciała dla wieku ciążowego, jak opisali Usher i McLean. 9 Dla celów analizy statystycznej masa urodzeniowa była również wyrażona jako liczba odchyleń standardowych od średniej dla wieku ciążowego. Rozpoznanie zespołu zaburzeń oddechowych oparto na objawach klinicznych (stękanie, retrakcja i częstość oddechów> 60 na minutę), typowe wyniki badań radiologicznych i zwiększone zapotrzebowanie na tlen.
Ekstrakcja i stężenie insuliny z surowicy i płynu owodniowego
Aby uwolnić insulinę związaną z przeciwciałami anty-insuliny w surowicy i płynie owodniowym, 0,5 do ml surowicy lub płynu owodniowego inkubowano z równą objętością 1% kwasu trifluorooctowego przez jedną godzinę w temperaturze pokojowej. Mieszaniny płynu surowiczego lub płynu owodniowego i kwasu trifluorooctowego przepuszczono przez wkłady z oktadecylową krzemionką (Sep-Pak C-18, Waters Associates, Milford, MA). Insulinę eluowano z naboju za pomocą modyfikacji metody Cohena i wsp. 10
Aby ocenić wydajność niezwiązanej insuliny wyekstrahowanej z surowicy, insulina świńska znakowana 125I lub nieznakowana została dodana do surowicy od osób zdrowych na czczo, a ekstrakcję przeprowadzono jak opisano powyżej. Po elucji wysuszony eluat zliczano w liczniku gamma dla radioaktywności 125I lub poddawano testowi radioimmunologicznemu na insulinę. Średnie (. SD) odzyskiwanie insuliny znakowanej 125I i insuliny nieznakowanej z tych próbek, które nie zawierały przeciwciała przeciw insuliny wyniosły odpowiednio 72,6 . 1,7 procent (n = 11) i 93,7 . 14,2 procent (n = 4).
Wysokosprawna chromatografia cieczowa insuliny
Rysunek 1
[patrz też: odczynnik millona, fascynujący świat nauki i technologii platforma, włoski wydzielnicze ]