Kliniczne spektrum rodzinnej migreny hemiplegicznej związanej z mutacjami w neuronalnym kanale wapniowym ad

Naszym celem było uzyskanie dużej, jednorodnej grupy osobników z mutacjami w CACNA1A, która pozwoliłaby na szczegółowy opis kliniczny zaburzenia i korelacji między genotypem a fenotypem. Metody
Przedmioty i kontrole
Wszystkie podmioty wyraziły pisemną świadomą zgodę, zgodnie z wymogami odpowiednich komisji ds. Ochrony tematów badań, i zostały przesłuchane i zbadane przez jednego z nas. Kryteria diagnostyczne International Headache Society zostały użyte do określenia rodzinnej hemiplegicznej migreny i innych odmian migreny.1 Badano dwadzieścia osiem niepowiązanych rodzin: 16 rodzin dotkniętych hemiplegiczną migreną ze znakami móżdżku, określoną przez obecność oczopląsu, ataksji lub obu co najmniej jednego członka (rodziny od do 16) i 12 rodzin dotkniętych czystą hemiplegiczną migreną, zdefiniowanych przez brak oczopląsu i ataksji u wszystkich badanych członków (rodziny od 17 do 28) .19 We wszystkich tych rodzinach, wcześniej dane dotyczące wiązania i haplotypów sugerowały powiązanie z chromosomem 19, chociaż dane były niejednoznaczne w niektórych małych rodzinach19. Badano również trzy osobniki z sporadyczną migracją hemiplegiczną z objawami móżdżku (Pacjenci 1, 2 i 3). Sto zdrowych małżonków osób dotkniętych hemiplegiczną migreną, którzy mieli to samo pochodzenie etniczne, wybrano jako grupę kontrolną.
Wykrywanie mutacji i genotypowania
Dodatek dodatkowy 1. Podstawy i warunki CACNA1A reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR). DNA przygotowano zgodnie ze standardowymi procedurami. Badanie przesiewowe pod kątem mutacji przeprowadzono w probandzie z każdej z 28 rodzin oraz osobników z przypadkami sporadycznymi z zastosowaniem analizy polimorfizmu konformacji pojedynczej nici (SSCP) 25, jak opisano wcześniej (informacje o starterach i warunkach są dostępne jako Dodatkowy Załącznik z pełny tekst tego artykułu na stronie http://www.nejm.org) .19 Sekwencję DNA wariantów konformacji określono za pomocą zestawu do sekwencjonowania cyklicznego barwnik-terminator (Perkin-Elmer, Foster City, CA) zgodnie z zgodnie z instrukcjami dostawcy. Sekwencja ludzkiego przekaźnika RNA (mRNA) X99897 dla podjednostki .1A kanału wapniowego typu P / Q została wykorzystana jako odnośnik.14 Dodatkowe sekwencjonowanie DNA CACNA1A – obejmujące sekwencjonowanie we wszystkich czterech powtórzonych domenach połączeń między trzecią i czwartą błoną – segmenty rozpraszające (S3 i S4); S4, S5 i S6; oraz pętli P – wykonano u probantów z rodzin 16, 18 i 28 oraz u Pacjenta 3, u których analiza SSCP nie wykazała żadnego nieprawidłowego konformera. Analizę SSCP wykorzystano do przetestowania każdego wariantu sekwencji DNA pod względem jego koagregacji z zajętym fenotypem w obrębie rodzin i określenia jego częstotliwości w 100 niespokrewnionych zdrowych kontrolach.
Analiza statystyczna
Wśród osób z mutacjami w CACNA1A, dokładny test Fishera zastosowano do porównania częstości objawów u osób, które były z rodzin dotkniętych hemiplegiczną migreną z objawami móżdżku oraz u osób, które były z rodzin dotkniętych czystą hemiplegiczną migreną.26 Ogólny test na równość proporcji z rozszerzeniem dokładnego testu Fishera (metoda Freemana-Haltona) użyto do porównania częstości objawów u nosicieli trzech najczęstszych mutacji związanych z hemiplegiczną migreną z objawami móżdżku.27 Wszystkie wartości P były dwustronne.
Wyniki
Badania genetyczne
Tabela 1
[hasła pokrewne: bmd osteoporoza, odruch ścięgna achillesa, oesophagitis chronica ]
[patrz też: enzalutamid, oesophagitis chronica, funkcja poznawcza ]